非洲爪蟾卵母细胞分期与选用（基于Dumont标准）
2025-05-08 21:16:11
1. 目的
明确爪蟾卵母细胞各发育阶段的形态特征与适用实验类型，指导实验人员在不同研究需求下选择合适分期的卵母细胞进行操作。
2. 分期依据
按照 Dumont 等人提出的标准，依据卵母细胞直径、色素沉着及形态特征，将非洲爪蟾卵母细胞划分为六个发育阶段（Stage I–VI）：
| 发育期 | 直径范围 | 主要特征 |
|---|---|---|
| 第I期 | 50–100 μm | 胞体透明，无明显色素沉着 |
| 第II期 | 300–450 μm | 胞体透明或呈淡白色 |
| 第III期 | 450–600 μm | 胞膜表面出现均匀色素沉着 |
| 第IV期 | 600–1000 μm | 明显出现两个半球：深色动物半球与白色植物半球 |
| 第V期 | 1000–1200 μm | 两半球界限清晰，动物半球呈深黑发亮色泽 |
| 第VI期 | 1200–1300 μm | 两半球间存在一条无色素带，体积最大 |
图：不同发育期的爪蟾卵母细胞
3. 卵母细胞的实验选用指南
根据实验类型选择合适分期的卵母细胞：
3.1 微注射类实验（如mRNA、cRNA注入）
推荐发育期：第VI期
原因与优点：体积最大（可注射体积最大至 100 nL），细胞结构完整，翻译效率高，适用于功能表达类实验（如离子通道或膜蛋白研究）。
3.2 电生理记录（如电压钳）
推荐发育期：第II期或第III期
原因与优点：细胞体积小、电容低，有助于提高记录精度，降低噪声，缩短稳定时间，适用于快速、稳定的膜电位分析。
4. 操作注意事项
分期应在显微镜下结合直径测量与形态特征同时进行，以提高分辨准确性
卵母细胞在解剖后宜保存于0.1×MMR（Modified Marc’s Ringer）溶液中，并在含抗生素（如庆大霉素）环境下短期培养，防止污染
对于大型细胞（V–VI期），注射操作时需注意针头直径与注射压力，避免破裂
5. 附注
Dumont分期标准为当前爪蟾卵母细胞分期的公认基础，在大多数分子、细胞和电生理实验中广泛采用。应根据研究目的合理选取细胞，避免盲目使用单一分期。