100X Steinberg’s Stock119g HEPES34g NaCl2.06g magnesium sulfate•(7 H2O)0.8g calcium nitrate•(4 H2O)0.5g potassium chloride
2019-03-05
配制流程初始溶解：取8 mL超纯水（18.2 MΩ·cm），依次溶解上述成分，磁力搅拌至完全溶解。pH调节：使用甲磺酸铯（CsOH）将溶液pH精确调整至7.2±0.05（25℃）。渗透压校准：加入超纯水定容至10 mL，确保溶液渗透压为250±2 mOsm/kg（冰点渗透压计验证）。分装存储：分装至500 μL无菌冻存管，-80℃避光保存，有效期30天。
2019-03-05
选择近半年内未取过卵母细胞的爪蟾，冰浴30-45min，待其四肢麻痹，翻正反射消失后，在其下腹部正中皮肤及内部肌肉处切一个0.5-1cm的小口，拉出宫瓣，剪出试验所需量的爪蟾卵母细胞，置于含OR2溶液（41mmol/LNaCl，1mmol/LKCl，0.5mmol/LMgCl2，2.5mmol/LHEPES）的培养皿中待用，缝合爪蟾的肌肉及皮肤，置于浅水中（注意使其头部露在水面上方），使其自然苏醒
2014-12-06 admin
通过高压电场瞬时改变细胞膜通透性，实现大分子（如质粒DNA）高效跨膜转运。定向电穿孔可靶向特定脑区（如单侧或双侧），适用于神经发育与功能研究（Haas et al., 2002）。
2014-06-01 admin
原理
单细胞电穿孔（Single cell electroporation, SCE）通过局部高压电场诱导细胞膜瞬时去极化，形成纳米级孔道（孔径1-10 nm），实现大分子（DNA、RNA、蛋白质等）靶向递送。该技术结合电泳效应与细胞膜动态修复机制，适用于单细胞精度基因操作（Haas et al., 2001）。
2014-06-01 admin
